柱前衍生与柱后衍生不同之处的比较:
1.柱前衍生:分析物通过色谱柱之前,先与衍生剂反应,反应产物在色谱柱上分离。实际分离出来的是衍生产物,检测出来的也是衍生产物。其优点在于反应条件的选择相对自由;衍生副产物可以进行预处理;可供选择的衍生品更多;对反应动力学没有限制;易于进行多步反应,不需要复杂的仪器和设备。
2.柱后衍生:分析物在色谱柱中分离后,与衍生池中的衍生剂反应,检测衍生产物。它的优点是重现性好,影响因素少,引入物质少,被分析物可按原样分离,易于选择现有的分析方法。
柱后衍生法首先将多组分样品注入色谱柱,根据选择的色谱条件在色谱柱I中进行分离。各组分流出色谱柱后,在一定的反应条件下与衍生化试剂反应,衍生化产物由人体检测器检测。常用的衍生方法包括紫外衍生、荧光衍生、电化学衍生和手性衍生。在柱后衍生过程中,要注意流动相和反应介质组成的一致性,衍生试剂和反应产物的溶解性,以及它们与流动相之间可能发生的副反应。同时要求待测组分从色谱柱到检测器之间的体积要很小,以尽量减小组分色谱带增宽对分离的影响。